Что значит спермограмма по Крюгеру

Обычная спермограмма дает оценку качества семенной плазмы (жидкости, в которой находятся половые клетки), позволяет определить концентрацию сперматозоидов и степень их подвижности, но не углубляется в структуру (морфологию). Спермограмма по Крюгеру (спермограмма с оценкой морфологии по строгим критериям Крюгера) – доскональное изучение строения сперматозоидов, в ходе которого лаборант-сперматолог сравнивает образцы в эякуляте с эталоном. Анализ обычно сдают для оценки шансов на естественное зачатие. Необходим он и для выбора оптимального варианта проведения ЭКО (ИКСИ, ПИКСИ или донорская сперма) и прогнозирования успешного исхода процедуры.

Особенности анализа

В эякуляте здорового мужчины находится огромное количество различных форм сперматозоидов (полиморфизм). Долгие годы ученые пытались их систематизировать, разделить на группы, отличить здоровых от дефектных. Делалось это для выявления зависимости между количеством определенных форм сперматозоидов и вероятностью естественного зачатия (подробнее о позах для зачатия).

Точку в этом вопросе поставил профессор Крюгер (Dr. Thinus Kruger) совместно с Менквельдом (Menkveld) в 1986 г. Был произведен сравнительный анализ двух групп сперматозоидов: достигших в течение 8 часов после эякуляции внутреннего зева матки (преодолевших цервикальную слизь) и оставшихся на уровне внешнего зева. Их параметры существенно отличались, из чего был сделан вывод: морфологически нормальными являются сперматозоиды из первой группы. Чем их больше, тем фертильнее мужчина, тем выше вероятность естественного зачатия. Структура этих сперматозоидов была тщательно изучена и принята за стандарт, эталон. Это так называемые строгие тайгербергские критерии, по которым и производится оценка мужских половых клеток.

Критерии сперматозоидов по Крюгеру

Параметры фертильного сперматозоида (по Mortimer & Menkveld, 2001):

1. Головка гладкая, овальная, с четкими контурами. Акросома (пузырек с ферментами в передней части головки) занимает от 40 до 70%. Сперматозоиды с аномалиями акросомы не способны проникнуть через оболочку яйцеклетки – она не растворится.
2. Шейка тонкая, выраженная, по длине примерно с головку, находится с ней на одной оси, без перекрутов.
3. Жгутик (хвост) тоньше шейки, одинакового диаметра почти по всей длине, которая должна быть примерно в 10 раз больше головки. Может закручиваться сам на себя. Главное, чтобы не было поломок, резких загибов под углом.

При оценке наиболее важным критерием является форма головки. Сперматозоид с аномальным строением данной части не только обладает сниженным оплодотворяющим потенциалом, но и несет опасность замершей беременности, выкидыша, патологий развития плода из-за повреждения ДНК.

Категории дефектов:

• Головка: слишком большая или маленькая, конусообразная, круглая, раздвоенная, с невыраженной акросомой;
• Шейка и средняя часть: гетероаксиальность (несимметричное присоединение), несоответствие толщины или длины;
• Основная часть хвоста: слишком короткая, загнутая, с неправильным контуром;
• Большая цитоплазматическая капля (остаток ткани после образования сперматозоида).

К особо опасным дефектам относятся ацефалические сперматозоиды (состоящие только из одного хвоста, головка теряется при формировании) и глобулозооспермия (мелкие круглые головки без акросомы).

Если параметры половой клетки отличаются от эталонных, она признается дефектной. При этом неважно, насколько значительны различия (поэтому критерии и называются строгими).

Как проводится анализ

Для проведения оценки морфологии по Крюгеру эякулят наносят на предметное стекло, высушивают, затем окрашивают и рассматривают под тысячекратным увеличением. Примеры применяемых красителей:

• По Papanicolaou – уменьшает сперматозоиды;
• Diff-Quik – увеличивает сперматозоиды;
• Sperm Blue – размеры не изменяются.

Окрашивание позволяет разделить различные области сперматозоида: головка приобретает один цвет в области акросомы, другой в задней части головки, средняя часть (тело), хвост, слишком выраженная цитоплазматическая капля также имеют свои оттенки. Пример окрашенных сперматозоидов приведен ниже.

Существует специальное программное обеспечение (спермоанализатор), позволяющее подробно анализировать структуру окрашенных сперматозоидов. Большинство клиник использует «Аргус-CASA». Камера передает изображение с предметного стекла микроскопа на экран компьютера, а программа автоматически классифицирует сперматозоиды в поле зрения, подсчитывает количество дефектных, определяет характер дефектов, процентное отношение патологических форм к нормальным. Пример работы программы:

Для проведения расширенной спермограммы по Крюгеру рассматривают примерно 400 сперматозоидов. Сначала оценивают 200, потом еще 200, затем сравнивают результаты и выводят среднее значение. В ходе анализа рассчитывают количество сперматозоидов с дефектами шейки, хвоста, головки, с цитоплазматическими каплями. При ручной обработке подсчет производят при помощи лабораторного счетчика (делают разное количество щелчков кнопкой для каждого дефекта). В итоге вычисляют общий процент нормальных форм − индекс Крюгера (Kruger Fertility Index — KFI).

У многих лабораторий есть компьютерное оснащение для оценки строгой морфологии по Крюгеру, но это еще не является гарантом достоверного результата. Важна квалификация специалистов, которые должны уметь настраивать микроскоп, владеть методиками работы с красителями, правильно интерпретировать данные.

Расшифровка, вероятность зачатия

Авторами строгих критериев были предложены две пороговые точки: 14 и 5% (таблица 1). Если у мужчины менее 5% нормальных сперматозоидов, то его шансы на естественное оплодотворение крайне низки, прогноз неблагоприятный даже при ЭКО (Таблица 2). Единственным вариантом для таких пар остается ИКСИ – введение отобранного нормального сперматозоида непосредственно в яйцеклетку. Если нормальных форм 14% и выше, сперма считается фертильной.

Таблица 1. Пороговые точки фертильности спермы (по строгим критериям Крюгера)

Таблица 2. Средняя частота оплодотворения (по данным журнала «Проблемы репродукции» № 3 за 2002 г)

По рекомендациям ВОЗ критерии не такие строгие. Нормой считается, если в сперме более 70% сперматозоидов без аномалий головки. При оценке по методу Крюгера даже у здоровых мужчин эякулят содержит не более 30% анатомически и функционально совершенных половых клеток.

Вы можете сами предварительно оценить результаты спермограммы с помощью онлайн-калькулятора (можно выбрать критерии ВОЗ или по Крюгеру):

Подготовка, где сдавать, цены

Спермограмма с оценкой морфологии по Крюгеру считается расширенной, но в каждой лаборатории это понятие может подразумевать различный набор анализов (мар-тест на IgG и IgA, биохимия спермы, иммунологический фактор, фрагментация). При выборе услуги «расширенная спермограмма» лучше предварительно уточнить, какие виды исследований в нее входят.

Подготовка к сдаче спермограммы по Крюгеру включает те же ограничения, что и для обычного анализа спермы (ознакомиться подробнее с условиями сдачи спермограммы).

Сдать спермограмму по Крюгеру можно практически в любом медцентре или независимой сетевой лаборатории. В «Инвитро» услуга обойдется в 1650 руб., в «Ситилаб» − 1500 руб., в клинике «ОсНова» (СПб) − 3360 руб., в сети клиник «МедСервисЦентр» (Москва) – 2000 руб.  Результат будет готов через день.

Отзывы

Даниил, 41 год: «В «Инвитро» и «Хеликс» сдавать спермограмму по Крюгеру не рекомендую – выброшенные деньги, нигде не принимают результаты, репродуктологи им не доверяют из-за слишком формального подхода к подсчету и оценке результатов. Лучше в госбольницах. В Питере можно доверять Мариинской, там грамотные специалисты».

Олег, 29 лет: «Слышал, что московские репродуктологи доверяют всего нескольким лабораториям: «ДНКом», МГНЦ РАМН (Москворечье) и еще какой-то третьей, не помню. Я сдавал в «ДНКоме», результаты были лучше по сравнению с репроклиникой «Альтравита» − 2% против 0,5».

Наталья, 42 года: «При проблемах с зачатием сразу сдавайте морфологию по Крюгеру. Для сперматозоидов важна не только способность быстро перемещаться и количество, многое зависит именно от их качества. Я несколько лет мучилась из-за невынашивания беременности, а проблема оказалась в плохой морфологии сперматозоидов мужа. Если бы сразу сдали анализ по Крюгеру, мне не пришлось бы терять здоровье и время».

Заключение

Спермограмма по Крюгеру – прогностически ценный, но сложный тип анализа. ВОЗ постоянно принимает меры для стандартизации методов исследования сперматозоидов, но различия сохраняются, а, соответственно, и вероятность ошибок на технических этапах. Результаты исследований в разных центрах могут различаться вплоть до 50%. Связано это с различными методами подготовки мазка спермы (фиксация, окрашивание), уровнем профессионализма лаборантов. Сдавать спермограмму по Крюгеру следует в лабораториях с жестким внутренним контролем качества (перепроверяют несколько раз, постоянно обновляют знания методик проведения анализа), желательно при государственных репродуктивных центрах.

Источники:

1. https://www.dia-m.ru/lab/mikroskopiya-sistemy-videodokumentirovaniya/apparatno-programmnyy-kompleks-dlya-analiza-izobrazheniy-argus-casa/
2. https://maximus2012.nethouse.ru/static/doc/0000/0000/0349/349989.hkxwiajjzo.pdf
3. http://www.rusmedserv.com/problreprod/2002g/3/article_966.html